標本教學
最後修改時間:2019-07-31 15:20
公告主旨:透明魚骨骼標本之製作
透明魚骨骼標本之製作
方法一(置作時間較長):
- 將魚標本置於5-10%之甲醛溶液2-3天或更久,但亦可直接進入第二部驟。
- 以蒸餾水滴洗2-3天,之後清理表面組織(鱗片)及內臟組織。
- 直接放置於混合溶液(10mg alcian blue 8NG + 80ml 95% alcohol+20ml冰醋酸)24-48小時。
- 用95 % 、90% 、40%、 15%之alcohol處理各2-3小時,各濃度連續重複兩次,直至標本沉下。
- 置於蒸餾水2-3小時,連續重複兩次直到標本下沉。
- 放置於酵素溶液中(30ml飽和硼酸鈉溶液+70ml蒸餾水+1g trypsin),但每隔2-3天溶液呈淺藍色時,需更換溶液,直至骨骼清楚看見,同時表層肌肉無藍色存在 P.S.:此步驟可花費2-3週的時間。
- 將溶液換成0.5%之KOH溶液,每隔1-2天更換溶液一次,直到魚體體色逐漸脫落。
- 更換新的KOH溶液,並加數滴alizarin red S.(alizarin red:冰醋酸:蒸餾=1:2:12),依標本大小而染色時間不同,直至骨骼完全染紅為止。
- 依次轉換KOH-甘油溶液(比例3:1,1:1,1:3)直到純甘油,在最初之KOH-甘油溶液中每100ml可加3-4滴3%之雙氧水。
- 將標本置於純甘油中保存,必要時加thymal來防霉防菌。
方法二:簡易製作法(只染硬骨"RED",不染軟骨"BLUE")
- 同上。
- 同上。
- 將標本置於2-4%KOH中,每天更換KOH直至可見到脊椎骨。
- 換KOH溶液並加alizarin red S,同<8>。
- 更新KOH溶液,使表層被染成紅色部分消失。
- 依次更換20% 、30%、 50%、 60% 、70% 、80% 、90% 、95%、 100% 之甘油。
- 同<10>。
使用藥物及功能:
- 甲醛(福馬林):脂化凝固。
- ALCOHOL(酒精):脫水脫脂。
- Alcianblue:染軟骨。
- 冰醋酸:溶解Alcianblue。
- Trypsin(胰蛋白酶):將protein切成小片段。
- 硼酸鈉:同上。
- KOH:使protein膨脹透明、脫色。
- Alizarin RedS :染硬骨。
- 甘油:使肌肉組織透明及保存。
- THYMAL:防腐。